陸道培醫(yī)療集團王卉主任擔(dān)任通訊作者的又一流式細胞術(shù)專家共識重磅發(fā)布！

2024年7月出版的《中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志》上，中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會委托陸道培醫(yī)療王卉主任、中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院劉貴建主任、國家癌癥中心/國家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心/中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院崔巍主任擔(dān)任通訊作者，組織來自全國26個省、自治區(qū)、直轄市的57家醫(yī)療機構(gòu)共71位專家共同參與的《流式細胞術(shù)臨床檢測圖文報告書寫專家共識》重磅發(fā)布。

這一專家共識是三位通訊作者共同擔(dān)綱的第五篇重磅流式細胞術(shù)（FCM）專家共識，對于推動中國FCM的規(guī)范化和發(fā)展進步，起到極大的作用。

2022年開始，三位通訊作者在臨床工作與行業(yè)交流中，發(fā)現(xiàn)FCM室間結(jié)果互認和會診困難，雖然試劑的入室驗證、檢測方案、儀器質(zhì)量控制、設(shè)門方法以及人員的主觀判斷是其中的重要環(huán)節(jié)，但是在這種高端技術(shù)標準化流程前路漫漫的情況下，最簡單、最快速、最實用的方法，是首先規(guī)范化圖文報告的書寫，可以解決絕大多數(shù)典型病例。為此，疫情期間，王卉主任首先根據(jù)三位通訊作者，以及中國中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院楊曦明、河北燕達陸道培醫(yī)院陳曼醫(yī)師、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院王慧君主任，江蘇省人民醫(yī)院（南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院）吳雨潔主任四位執(zhí)筆人的初步探討和集體意見后，撰寫出第一版意見稿，并進一步召開網(wǎng)絡(luò)擴大會議探討，最終形成10條專家共識意見，并附帶免疫分型和微小殘留病（MRD）兩個圖文報告的樣板。

本專家共識的適用范圍和主要內(nèi)容都一哪些？

本共識適合各類醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室和健康體檢中心等相關(guān)單位人員。共識主要規(guī)范了FCM臨床檢測報告中的基本信息、方法學(xué)描述、結(jié)果分析與結(jié)論、圖片展示、審核與簽發(fā)等內(nèi)容。

FCM臨床檢測報告的基本信息包括哪些？

FCM臨床檢測報告的基本信息主要包括患者信息、臨床信息、申請信息、樣本信息4個部分。如有其他可能影響檢測結(jié)果的相關(guān)信息（如特殊治療或樣本狀態(tài)）應(yīng)予以備注。

FCM臨床檢測報告的方法學(xué)描述包括哪些？

FCM臨床檢測報告的方法學(xué)描述包括：儀器及試劑信息、熒光素標記抗體組合方案、樣本制備方法和樣本檢測信息等。

FCM臨床檢測項目分為兩大類：臨床診斷項目（如免疫分型和MRD）和非診斷性項目（例如免疫細胞亞群檢測），前者檢測方案復(fù)雜，需進行方法學(xué)描述，以供實驗室間交流及結(jié)果互認；后者檢測靶標和抗體方案具有一定通用性，可不描述或簡要描述方法學(xué)。

共識1：在FCM臨床檢測圖文報告的方法中，建議提供流式細胞儀、分析軟件、主要熒光素標記抗體的相關(guān)信息，對疾病具有重要診斷價值的抗體需具體到抗體類別和克隆號；其他主要試劑注明廠家或配制方法。推薦強度：強烈建議。

共識2：對FCM的樣本制備信息予以簡單描述，提供主要檢測管的熒光素標記抗體組合方案（可在圖片中標注），簡述關(guān)鍵操作步驟；樣本制備完成后，若不能立即上機檢測，需注明保存條件與時間；注明收集的細胞總數(shù)。推薦強度：一般建議。

FCM臨床檢測報告的描述方式有哪些？

FCM臨床診斷項目如免疫分型和MRD需提供完整的檢測結(jié)果、結(jié)論，并附帶FCM彩色二維點圖。免疫細胞亞群的臨床檢測報告一般只需提供檢測結(jié)果（多以表格形式提供，附帶健康群體參考區(qū)間），除非具有明確檢測目的或臨床截斷值的項目，否則一般不提供結(jié)論，且無需提供附圖。

FCM臨床檢測報告結(jié)果中的術(shù)語描述規(guī)范？

FCM臨床診斷項目的檢測報告主要描述抗原表達的結(jié)果，包括抗原表達的比例和強度。其中抗原表達比例的描述涉及閾值，而表達強度的描述涉及內(nèi)對照細胞群。

大多數(shù)抗原表達與否的判斷使用表1，如有研究結(jié)果支持，也可采用其他特殊閾值并注明。例如，早期前體T急性淋巴細胞白血病/淋巴母細胞淋巴瘤CD1a和CD8陰性表達要求低于5%；而急性白血病系別判斷中，關(guān)于髓過氧化物酶陽性的定義為高于3%～28%；其他特殊情況，如靶向治療中涉及的腫瘤細胞靶點篩查，除了陽性和陰性，還需給出腫瘤細胞特定抗原的表達百分比）。

關(guān)于抗原表達強度，建議使用增強（bright，bri）或減弱（dim）描述病理性細胞（例如惡性、克隆性、異常細胞）的抗原表達強度改變；使用高（high,hi）或低（low,lo）描述非病理性細胞（如免疫細胞亞群和正常內(nèi)對照細胞）的抗原表達強度差異。

FCM臨床檢測報告的結(jié)果如何描述？

FCM臨床診斷項目（如免疫分型和MRD）的檢測報告需對樣本中主要細胞群特別是異常細胞群的百分比及抗原表達情況進行客觀描述，同時根據(jù)抗原表達情況判斷異常細胞群體所代表的血細胞系別和成熟階段，結(jié)合臨床信息給出相關(guān)疾病診斷或提供傾向性意見。

共識3：FCM臨床診斷項目（如免疫分型和MRD）的檢測報告需提供完整的檢測結(jié)果、結(jié)論和彩色二維點圖。檢測結(jié)果需客觀描述樣本中主要細胞群情況：（1）腫瘤細胞、異常細胞、正常細胞群占有核細胞百分比，必要時描述亞群細胞占某群細胞的百分比甚至單位體積的細胞絕對數(shù)；（2）目的細胞抗原表達比例（陽性表達或者部分陽性表達、陰性表達），必要時提供表達百分比；目的細胞抗原表達強度（bri、dim、heter）；特殊標志物需提供熒光強度（MdFI或MFI），必要時選擇陰性對照細胞或熒光微球進行MdFI或MFI校準。結(jié)論部分針對檢測結(jié)果做出相關(guān)疾病診斷或疑似診斷，必要時給出進一步檢測建議。推薦程度：強烈建議。

共識4：免疫細胞亞群檢測的臨床報告一般只需提供檢測結(jié)果以及健康群體參考區(qū)間，檢測結(jié)果脫離參考區(qū)間的項目以升高（↑）或減低（↓）警示，除具有明確檢測目的或臨床截斷值的項目，否則一般無需提供結(jié)論及附圖。推薦程度：一般建議。

共識5：描述抗原表達比例需參考閾值，目的細胞群抗原表達率≥80%為陽性表達（簡稱表達），目的細胞群中胞膜抗原表達率為20%～＜80%或胞漿抗原表達率為10%～＜80%為部分陽性表達（簡稱部分表達），目的細胞群中胞膜抗原表達率<20%或胞漿抗原表達率<10%為陰性表達（簡稱不表達）；若有研究結(jié)果支持某界值具有相關(guān)臨床意義，則可采用特殊閾值并注明。推薦強度：強烈建議。

共識6：FCM臨床檢測項目中，建議使用增強（bri）或減弱（dim）描述病理性細胞（包括惡性、克隆性、異常細胞）的抗原表達強度改變；非病理性細胞（如免疫細胞和正常內(nèi)對照細胞）不同亞群的抗原表達強度采用高（hi）或低（lo）進行描述。推薦強度：強烈建議。

FCM臨床檢測報告附流式圖要求有哪些？

FCM臨床診斷項目的檢測報告應(yīng)依據(jù)診斷需求提供全面、清晰的彩色流式圖，圖中應(yīng)包含診斷所需的設(shè)門信息、主要免疫標志和熒光參數(shù)信息。免疫細胞亞群檢測項目如TBNK淋巴亞群分析僅報告成熟的非腫瘤性免疫細胞亞群的百分比和絕對計數(shù)值，可不提供檢測圖片。

共識7：FCM臨床檢測報告圖片建議采用彩色二維點圖。要求顯示比例尺和坐標軸代表參數(shù)（包括FSC、SSC、熒光素及標記抗體，上述參數(shù)指標產(chǎn)生的強度信號）；一般熒光信號首選A，少數(shù)選擇H，幾乎不選擇W。進行有核細胞分析時，檢測指標的數(shù)值顯示方式：FSC一般使用lin，SSC使用lin和log均可，熒光信號絕大多數(shù)使用log或者指數(shù)或者雙指數(shù)。使用橫、縱坐標離開原點的距離代表熒光信號強度（熒光強度）的強弱，必要時顯示MdFI或者MFI；圖片應(yīng)清楚顯示目的細胞群與內(nèi)對照細胞群的抗原表達關(guān)系。推薦強度：強烈建議。

共識8：FCM臨床檢測報告中應(yīng)描述設(shè)門方法，并提供完整的彩色圖片。臨床診斷圖片需依次設(shè)置活細胞門和單個細胞門，并從單個活細胞開始使用CD45/SSC設(shè)置各主要細胞群，必要時使用反向設(shè)門和序貫設(shè)門。推薦強度：強烈建議。

共識9：FCM臨床檢測圖片需提供單個活細胞中各主要細胞群的設(shè)門方式、占有核細胞百分比，所有檢測抗原在各主要細胞群的表達情況。對于腫瘤細胞因占有核細胞比例低，全圖不能清楚顯示的病例，建議另外提供重點顯示腫瘤細胞群與內(nèi)對照細胞群的圖片。推薦強度：強烈建議。

共識10：彩色二維點圖中，結(jié)合設(shè)門技術(shù)，每個實驗室可按照習(xí)慣設(shè)置不同細胞群的顏色，原則是同一個病例的多管組合圖上，使用不同顏色代表不同細胞群；盡量選擇鮮艷的顏色代表腫瘤細胞群或者重要的低比例細胞群（如原始細胞群）。建議將低比例、目的細胞群群置于上層，高比例、背景細胞群置于下層，必要時使用軟件功能突出顯示目的細胞群。代表不同細胞群的顏色應(yīng)清晰，色彩差別大。推薦強度：強烈建議。

FCM臨床檢測報告的審核與簽發(fā)？

FCM臨床診斷報告需要具備資質(zhì)的醫(yī)師或授權(quán)簽字人審核后簽發(fā)，簽發(fā)者和/或?qū)徍苏咭话阌舍t(yī)院和其他檢測機構(gòu)根據(jù)國家相關(guān)部分法規(guī)進行資質(zhì)確定和能力考核后授權(quán)。報告中需注明檢測者、審核者、報告時間、實驗室地址和聯(lián)系方式等。

總之，FCM問世半個世紀以來，在臨床檢測中起到舉足輕重的作用，但是作為人工參與度極高的特殊檢驗技術(shù)，規(guī)范化、標準化和室間互認困難，為此中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會委托王卉、劉貴建、崔巍主任三位通訊作者和全國眾多共識參與者相繼推出了五篇FCM相關(guān)專家共識，極大推動了規(guī)范化歷程，此次推出的專家共識，是業(yè)界又一重大舉措。

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